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HLA分型產品介紹

    生物芯片技術是隨著“人類基因組計畫”(human genome project,HGP)的進展而發展起來的,它是上世紀90年代中期以來影響最深遠的重大科技進展之一,被廣泛應用于基因序列分析、基因突變檢測及單核苷酸多態性分析、基因組文庫圖型分析以及疾病的基因診斷等領域。其特點是一次試驗能得到大量的生物學資訊。所謂生物芯片是由固定於不同種類介質上的高密度的寡核苷酸分子、基因片段、多肽分子或蛋白的微陣列組成,目前常用的介質有玻璃、塑膠、矽質和紙膜等。生物芯片包括基因芯片、蛋白質芯片、細胞芯片、組織芯片、以及元件型微陣列芯片、通道型微陣列芯片、生物傳感芯片等新型生物芯片。其中的基因芯片(gene chip)也叫DNA芯片、DNA微陣列(DNA microarray)、寡核苷酸陣列(oligonucleotide array)。基因芯片又分為固相基因芯片和液相基因芯片兩種。

    2000年6月本公司在上海市科委重大專案“應用型基因芯片”的公開招標中一舉中標,從而開始了“人類白細胞抗原(Human Leucocyte Antigen,HLA)分型基因芯片”的研發工作。至今,此專案已進行了7年並取得成功,開發出一套試劑盒用於HLA分型,目前已經投入客戶試用和批量生產。下面就是本公司HLA分型產品的簡單介紹。
名稱:優諾基HLA-SSO流式螢光微珠基因分型試劑盒
基本原理和實驗過程:


PCR擴增
設計各位點的通用性引物,對主要基因變異區進行PCR擴增,其中A、B位點擴增片斷包括完整的第2外顯子和大部分第3外顯子,DRB1位點擴增片斷包括完整的第2外顯子;
DNA雜交
擴增的DNA產物與偶聯在螢光編碼微珠(簡稱微珠,Beads)上的特異性寡核苷酸探針進行雜交;
標記
雜交完畢經洗滌後,將經鏈親素修飾的藻紅蛋白(SAPE)與雜交後的微珠溫育,通過鏈親素與生物素的反應,使螢光報告分子SAPE特異性結合到微珠上;
檢測
Luminex分析儀使微珠排成單列通過檢測通道,使用雙色鐳射同時激發微珠內的分類螢光物質發出紅色分類螢光、微珠表面的報告分子SAPE發出綠色報告螢光並進行檢測,其中紅色分類螢光可判定微珠的特異性(定性),而綠色報告螢光可測定微珠上的螢光標記強度從而可準確定量待檢物;
結果判斷
     使用優諾基HLA分型軟體,對檢測資料進行分析,得到標本的HLA-A、B、DRB1基因分型結果。

技術特點:
強大的多指標同時檢測(all in one)方式,節省更多成本;基於不連續探針技術設計的特異性探針具有強大的分辨功能;高效,簡便,快捷,結果明晰。

LNA技術
部分探針設計引入了LNA(Locked Nucleic Acid)技術,提高了堿基錯配的區分能力;
較大的樣本處理能力, 配合使用專用的雜交盒1人1個工作日可輕鬆做至96個標本的3個位點的分型;
強大的軟體功能 配套軟體使結果分析自動化,並有強大的資料管理功能;

解析度
本產品定位於中解析度,符合中華骨髓庫的入庫標準。使用國際組織相容性工作組(International Histocompatibility Working Group,IHWG)提供的28個參比細胞株驗證本系統,結果A,B,DRB1三個位點的符合率分別為100%,100%,100%。

同時本產品還參加了中國紅十會提供的500個血樣和上海血站提供的200多個血樣分型驗證,A,B,DRB1三個位點的綜合符合率為98%左右,並成為紅會指定的三家分型試劑供應商之一。

 

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